色譜法是一種用于分離、凈化和分析化合物的常用技術(shù)。色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化學(xué)、材料、環(huán)保等領(lǐng)域。本文將對(duì)色譜法的分析技術(shù)和色譜儀操作方法進(jìn)行介紹。

一、色譜法分析技術(shù)

1. 氣相色譜法

氣相色譜法（Gas Chromatography，GC）是一種常用的分離和分析不揮發(fā)性或熱不穩(wěn)定的有機(jī)化合物的方法。它是一種在高真空下進(jìn)行的涂層色譜法，其分離基質(zhì)是以惰性支撐物為主，并填充惰性填充物。

氣相色譜法分離原理是依照氣相和固相的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)，即通過(guò)樣品被帶著惰性載氣在列管上分離達(dá)到各自出口時(shí)分離出來(lái)。在氣相色譜分析過(guò)程中，可以通過(guò)調(diào)整縱向溫度梯度、惰性載氣種類(lèi)及流速、固定相選擇等來(lái)達(dá)到優(yōu)化分離結(jié)果的目的。

氣相色譜法應(yīng)用非常廣泛，如環(huán)境檢測(cè)、藥物及毒物檢測(cè)、食品檢驗(yàn)等。

2. 液相色譜法

液相色譜法（Liquid Chromatography，LC）是一種將溶液中的物質(zhì)分離出來(lái)的方法。 液相色譜法是采用固定的相（固定相），列易進(jìn)行分離作用。

液相色譜法的分離基質(zhì)是固定相，其分離原理是根據(jù)溶液中不同物質(zhì)對(duì)固定相（國(guó)際上稱(chēng)固定相為膜）的親和力分離。依據(jù)固定相的種類(lèi)，可以分為反相色譜、陽(yáng)離子交換色譜和離子析出 色譜等多種類(lèi)型。

液相色譜法應(yīng)用也非常廣泛，如污染水體中有機(jī)物和無(wú)機(jī)物的測(cè)試、食品測(cè)試、生物醫(yī)學(xué)研究以及新藥研究分析等。

3. 薄層色譜法

薄層色譜法（Thin-Layer Chromatography，TLC）是一種簡(jiǎn)單易行，操作方便的分析方法。它是在硅膠或氧氣化鋁薄膜的表面加上待分離物，經(jīng)過(guò)分析后，再進(jìn)行顯色或發(fā)光的檢測(cè)技術(shù)。

薄層色譜法的分離基質(zhì)是固定相，分離原理類(lèi)似于液相色譜法，但膜層是可堿被方便取樣、快速分析的樣板。其標(biāo)準(zhǔn)分析方法是將待分析物體與膜層按比例混合后涂于定量的硅膠層，然后適當(dāng)將膜層按照規(guī)定孔數(shù)壓在導(dǎo)液池內(nèi)進(jìn)行分離，在浸色或加熱下得到分離結(jié)果。

薄層色譜法用于分離和檢測(cè)各種有機(jī)化合物、藥物、生物大分子等。

二、色譜儀操作方法

1. 氣相色譜儀操作方法

（1）啟動(dòng)色譜儀：打開(kāi)氣源、點(diǎn)火、檢查火焰是否穩(wěn)定。

（2）檢查色譜柱：檢查廢氣口和進(jìn)樣口是否穿透。

（3）設(shè)計(jì)分析方法：選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ?、載氣、溫度梯度等條件進(jìn)行分析。

（4）進(jìn)樣：進(jìn)樣前，請(qǐng)清洗進(jìn)樣管內(nèi)部，并增加樣品依照容量，應(yīng)封口。

（5）進(jìn)行分析：在選擇好的分離條件下，進(jìn)行分析，將結(jié)果繪制成色譜圖。

（6）數(shù)據(jù)處理：對(duì)得到的色譜圖進(jìn)行處理，如結(jié)果分析、峰的識(shí)別和定量分析等。

2. 液相色譜儀操作方法

（1）樣品制備：采樣并經(jīng)相應(yīng)的加工制備成標(biāo)準(zhǔn)溶液。進(jìn)樣前一定要檢查樣品，以便確定進(jìn)樣量。

（2）選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相：選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相、流速，以確保分離分析的更佳結(jié)果。

（3）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案：選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ唷悠沸Ｕ葪l件進(jìn)行分析。

（4）進(jìn)樣：打開(kāi)進(jìn)樣閥門(mén)，裝置好樣品后進(jìn)行進(jìn)樣。請(qǐng)注意，不要引起誤差。

（5）進(jìn)行分析：選擇好分離條件后，選擇樣品分離。測(cè)量完畢以后，繪制成色譜圖并進(jìn)行分析。

（6）數(shù)據(jù)處理：對(duì)得到的色譜圖進(jìn)行處理，識(shí)別峰，進(jìn)行分離和定量分析等。

3. 薄層色譜儀操作方法

（1）樣品制備：采樣并經(jīng)相應(yīng)的加工制備成標(biāo)準(zhǔn)溶液。進(jìn)樣前一定要檢查樣品，以便確定進(jìn)樣量。

（2）加樣：利用超微量注射器將標(biāo)準(zhǔn)溶液加入進(jìn)樣口。

（3）進(jìn)行分離：操作樣品上分離，時(shí)間為10~15分鐘。

（4）顯色或發(fā)光：加入適量的顯色或發(fā)光再分析。

（5）數(shù)據(jù)處理：對(duì)得到的色譜圖進(jìn)行處理，識(shí)別峰，進(jìn)行分離和定量分析等。

綜上所述，色譜法是一種常用的分離、凈化和分析技術(shù)，包括氣相色譜法、液相色譜法和薄層色譜法等。色譜儀的操作方法應(yīng)該根據(jù)不同的儀器類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)要求而定。熟練使用各種類(lèi)型的色譜儀有助于提高實(shí)驗(yàn)的精度和準(zhǔn)確性。